抗黄曲霉毒素M1单链抗体基因克隆与蛋白结构模拟
为构建抗黄曲霉毒素M1单链抗体(scFv)基因,并进行蛋白质结构模拟及理化特性分析.采用重叠延伸PCR方法,以能特异性分泌抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的杂交瘤细胞株1B12为原料,构建其单链抗体基因,进行测序,采用生物信息软件进行氨基酸序列推导、结构预测以及理化性质分析.抗黄曲霉毒素M1 scFv基因全长737 bp,对应245个氨基酸,单链抗体分子量约为25 897.4,等电点预测值6.90;二级结构显示抗黄曲霉毒素M1单链抗体含α螺旋38处,β折叠24处,延伸链74处,随机卷曲109处.三级结构建模显示重链(VH)和轻链(VL)的6个环区(CDR区),共同组成抗体的抗原结合区,符合scFv的结构特点,具有抗原结合位点的空间构象.构建了一个抗黄曲霉毒素M1 scFv基因,应用生物信息学技术所获得的预测和分析结果为该单链抗体的进一步表达、纯化和活性研究提供信息.
黄曲霉毒素M1、单链抗体、结构预测
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Q51(蛋白质)
农业部948项目2010-G1;2011-G5;国家自然科学基金资助项目31171702;31101299;国家农业行业科技专项资助项目201203094;201203037;国家科技支撑计划资助项目2012BAB19B09;2012BAK08B03;中国农业科学院油料作物研究所所长基金1610172010003
2012-12-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
963-966