4-甲基苯酚多克隆抗体的制备及应用

摘要：

针对4-甲基苯酚(4-MP)的结构特点及半抗原设计原则,选择对羟基苯丙酸(34-HPA)作为半抗原,通过活化酯法与牛血清白蛋白(BSA)偶联合成人工免疫原,免疫3～4m的雄性大白兔,制得多克隆抗体效价为1∶204 800.同时采用混合酸酐法合成半抗原-卵清蛋白(OVA)偶联物作为包被原,以4-MP为竞争的抗原,建立间接竞争ELISA检测方法.实验结果表明,理想工作条件为:包被原浓度1.05 μg/mL,抗体稀释倍数1∶12 800,酶标二抗稀释倍数1∶1 000,0.1％明胶封闭1.5h,竞争时间与酶标二抗反应时间均为1.0h.4-甲基苯酚在81.0 ×10-2～1 0 ×103的范围内呈线性相关,得标准曲线方程y=- 12.76x +66.66,最低检测限δ0.02,板内差异为7.0％,板间差异为8.4％.

关键词：4-甲基苯酚、间接竞争ELISA、胃癌、尿液

所属期刊栏目：34

分类号：O656.3(分析化学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目21177082;上海交通大学理工交叉研究基金

在线出版日期：2012-07-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：485-488,554