防御素HNP-3成熟肽酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活和毒性检测

摘要：

目的 用含防御素HNP-3成熟肽cDNA片段构建酵母双杂交诱饵质粒,进行自激活和毒性检测.方法 培养HL-60细胞,提取RNA,RT-PCR扩增含防御素HNP-3成熟肽的cDNA片段,克隆入pBluescript-SK-II质粒,经测序鉴定后,再亚克隆到人酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,PCR及测序鉴定.重组诱饵质粒用缺陷培养基筛选方法进行自激活和毒性检测. 结果构建的重组质粒pBluescript-SK-II-HNP-3,经测序鉴定,插入片段为HNP-3成熟肽的cDNA序列.亚克隆构建的重组诱饵质pGBKT7-HNP-3,测序鉴定表明其插入目的 基因序列无误.重组诱饵质粒自激活和毒性检测显示无自激活现象发生,对酵母细胞AH109无毒性作用. 结论成功构建了防御素HNP-3成熟肽的酵母双杂交诱饵载体;为用酵母双杂交技术研究与防御素HNP-3成熟肽相互作用蛋白质打下了基础.

关键词：防御素、HNP-3、成熟肽、酵母双杂交

所属期刊栏目：14

分类号：R392.32;Q789

资助基金：国家自然科学基金3040763;30671963

在线出版日期：2007-05-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：151-153