花生Δ12脂肪酸脱氢酶基因FAD2的克隆及反义表达载体的构建

摘要：

从花生的幼嫩叶片中提取总DNA,应用PCR方法分离到了两个FAD2基因片段,分别命名为FAD2-1和FAD2-2,将反向的FAD2-1和FAD2-2片段分别与所克隆的大豆油体蛋白基因启动子片段oleosin-a与oleosin-b相连,在中间表达载体pSPROK中构建了三个带T-nos的融合基因,进而把融合基因构建到植物表达载体pCAMBIA1300中,酶切鉴定后进行测序,结果表明,所构建的三个植物表达载体均分别带有Oleosin启动子和反义FAD2基因序列,FAD2-2的长度为593bps,与引用序列的同源性达到97%,包含一个起始密码子;FAD2-1的长度为1175bp,与引用序列的同源性达到99%,包含一个起始密码子与一个终止密码子.将构建好的植物表达载体已经转化农杆菌LBA4404并用于侵染花生外植体.

关键词：Δ12脂肪酸脱氢酶基因、克隆、反义RNA、载体构建

所属期刊栏目：36

分类号：S565.2;Q782(经济作物)

资助基金：国家自然科学基金30070481

在线出版日期：2007-06-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1-6,12