ATP6AP2基因的克隆与其表达载体的构建

摘要：

为了研究ATP6AP2的生物学功能,利用NCBI数据库确定了人源ATP6AP2基因的CDS序列,设计上游及下游引物.采用TRIZOI法提取293T细胞RNA并反转录合成cDNA,PCR扩增ATP6AP2基因全长序列并将得到的PCR产物经双酶切后与载体连接,转化大肠杆菌.通过PCR菌液鉴定和酶切验证,获得融合ATP6AP2基因序列的真核表达载体.用脂质体包裹该重组质粒转染293T细胞后,Western blot检测ATP6AP2的表达.结果表明,通过基因克隆成功构建了人源ATP6AP2重组真核表达载体,转染后的293T细胞高效表达EGFP-ATP6AP2融合蛋白,为进一步探究ATP6AP2基因的生物学功能提供了研究基础.

关键词：ATP酶转运辅助蛋白;真核表达载体;基因克隆

所属期刊栏目：37

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：湖北理工学院大学生创新创业训练计划项目;湖北理工学院人才引进项目

在线出版日期：2021-08-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：60-64