快速简单组织定位甘蔗RSD致病菌Lxx的原位PCR方法

摘要：

提出对甘蔗冰冻切片中甘蔗宿根矮化病(RSD)致病菌Lxx(Leisoniaxyli subsp.xyli)进行定位的原位多聚酶链式反应(in situ PCR)方法,为Ixx与甘蔗互作致病机理研究提供有效的实验手段.以染RSD甘蔗品种Badila及其健康株为材料取样制作冰冻切片,切片经溶菌酶消化后,利用病原菌Lxx 16S～23S rDNA内部转录间隔区(ITS)特异性引物进行原位PCR扩增,并对随机参入扩增片段的与地高辛-11-dUTP进行免疫组化,建立甘蔗样品冰冻切片中直接原位PCR方法.结果表明:直接原位PCR对RSD蔗株茎样品切片显色为阳性,阳性信号出现于甘蔗茎部的木质部、韧皮部,而健康蔗株茎样品无信号,方法特异性较好.

关键词：甘蔗宿根矮化病、革兰氏阳性苛养致病菌、冰冻切片、原位多聚酶链式反应

所属期刊栏目：39

分类号：Q945.8(植物学)

资助基金：国家自然科学基金青年科学基金资助项目31301381

在线出版日期：2018-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：221-226