重组人 VEGF165蛋白在毕赤酵母中高效表达与多克隆抗体的制备

摘要：

构建 pPIC9K-VEGF165分泌型载体，线性化后电击转化至 GS115（his4）中，经最小葡萄糖培养基（MD 平板）筛选出阳性表达菌株并进行聚合酶链式反应（PCR）验证．菌株发酵上清液经 Sephadex G-25，Hep-arin Sepharose FF 和 Sephacryl S-100层析介质分离纯化，目的蛋白纯度达到95％，相对分子质量约为24 ku．结果表明：重组人 VEGF165蛋白能诱导人脐静脉内皮细胞（HUVEC）增殖，提高 HUVEC 细胞的活性；重组人 VEGF165蛋白免疫小鼠，制备多克隆抗体，间接酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测抗体效价达1：51200．

关键词：重组人VEGF165蛋白、多克隆抗体、毕赤酵母、高效表达

分类号：Q815(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金资助项目81271691；国际科技合作项目2011DFG33320；福建省科技重大项目2013N5007；华侨大学科研基金资助项目11HZR19

在线出版日期：2014-12-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：695-700