表达Kallistatin的9型重组腺相关病毒的制备及其体外表达效率

摘要：

采用三质粒磷酸钙共转染生产系统,制备出可以表达内源性抗肿瘤血管生成因子(Kallistatin)的9型重组腺相关病毒(rAAV2/9)和2型重组腺相关病毒(rAAV2/2).rAAV经银染法鉴定其纯度；采用Western Blotting法比较rAAV2/9和rAAV2/2外壳蛋白的大小；qPCR方法检测rAAV的滴度.使用rAAV2/9-Kal-listatin和rAAV2/2-Kallistatin分别感染人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)后,RT-PCR和ELISA法分别检测Kallistatin的mRNA和蛋白表达水平.结果表明:纯化的病毒纯度达到98％以上；rAAV9外壳蛋白比rAAV2的大.感染HUVEC后,rAAV2/9介导Kallistatin在mRNA和蛋白表达水平都要比rAAV2/2高.

关键词：9型重组腺相关病毒、Kallistatin、表达效率、人脐静脉血管内皮细胞

所属期刊栏目：34

分类号：R969.4(药理学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81072578;福建省自然科学基金资助项目2010J05026;福建发改委项目20090205;福建省厦门市科技计划项目3502Z20053046

在线出版日期：2013-03-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：68-71