脂质体转染人肝星状细胞和肝细胞条件优化

摘要：

利用Lipofectamine 2000(Lipo)介导LacZ及EGFP基因转染人肝星状细胞系LX-2和人肝细胞系Chang Liver,探讨Lipo用量、质粒用量、转染时间、细胞初始接种密度及不同启动子驱动对转染效率的影响.结果显示,两种细胞均能得到高效转染,Chang Liver细胞转染效率(>80%)高于LX-2细胞(>60%).Lipo用量为每孔2 μL,转染后6 h换液,LX-2细胞应用质粒DNA为每孔0.45 μg,Chang Liver细胞应用质粒DNA为每孔0.30～0.45 μg,此时转染效率最高. 巨细胞病毒(CMV)启动子驱动LacZ转染效率与CMV早期增强子/鸡β肌动蛋白(CAG)启动子驱动增强型绿色荧光蛋白(EGFP)转染效率无显著差异;细胞初始接种密度对转染效率无显著影响.

关键词：脂质体、肝星状细胞、肝细胞、转染效率

所属期刊栏目：31

分类号：Q753(分子遗传学)

资助基金：厦门市科技计划项目3502Z20053046;泉州市科技计划项目2007Z41;华侨大学高层次人才科研启动项目09BS516

在线出版日期：2010-03-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：49-52