重组大鼠细胞球蛋白的制备、纯化与活性

摘要：

通过聚合酶链式反应(PCR)克隆鼠源细胞球蛋白(Cytoglobin,CYGB)基因,构建原核表达载体pET22b-Cygb,转入E. coli BL21(DE3)经乳糖诱导表达CYGB,发现CYGB主要以可溶形式存在,其表达量占可溶性总蛋白的35%以上.通过DEAE阴离子交换柱层析和Sephacryl S-100凝胶过滤层析,CYGB纯度可超过95%.重组表达的可溶性CYGB不但具有过氧化物酶活性,其活性为(3.23±0.12) mkat·(g·min)-1,还能保护胎鼠原代皮肤成纤维细胞减轻氧化应激损伤(H2O2模型).

关键词：重组细胞球蛋白、高效可溶表达、分离纯化、鉴定、活性检测

所属期刊栏目：30

分类号：Q512+.2;Q503(蛋白质)

资助基金：国家高新技术研究发展863计划项目2005216060, 2008AA022135;福建省自然科学基金资助项目2007J0105;福建省科技厅重点项目2008Y0084

在线出版日期：2009-12-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：668-672