富营养化湖泊水体中藻蓝蛋白提取方法的对比
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富营养化湖泊水体中藻蓝蛋白提取方法的对比

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藻蓝蛋白是蓝藻的指示型色素,目前还没有标准的提取方法,特别是萃取剂的选择品种较多,对测量结果影响较大.分别以室内培养的铜绿微囊藻和巢湖夏季野生蓝藻为提取对象,运用液氮反复冻融法破碎蓝藻细胞,分别以Asolctin-CHAPS缓冲液(AC)、磷酸盐缓冲液(PBS)和Tris-HCl缓冲液来提取藻蓝蛋白,通过分光光度法分析提取液的吸收光谱、藻蓝蛋白浓度以及藻蓝蛋白浓度与叶绿素a浓度的相关性,比较3种缓冲液的提取效果.结果显示:3种缓冲液提取的藻蓝蛋白提取液在620 nm处都出现了藻蓝蛋白的特征吸收峰,但AC缓冲液和PBS缓冲液提取效率明显高于Tris-HCl缓冲液.另外,虽然AC缓冲液提取效率最高,但其成本昂贵、配制过程复杂且不易控制、难保存,不适宜大规模地推广应用;而PBS缓冲液的提取效率略低于AC缓冲液,但其配制方便快捷,更适合于大规模湖泊水质监测的要求,因此推荐PBS缓冲液作为常用的藻蓝蛋白提取液.

藻蓝蛋白、Asolctin-CHAPS缓冲液、磷酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲液、蓝藻、色素提取、巢湖

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X83;X52

国家高技术研究发展计划“863”项目2014AA06A509;国家自然科学基金项目41171271,41171273,41101316;国家水体污染控制与治理科技重大专项项目2012ZX07103-005;中国科学院南京地理与湖泊研究所“一三五”战略发展规划项目NIGLAS2012135014,NIGLAS2012135010

2015-01-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共8页

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湖泊科学

1003-5427

32-1331/P

26

2014,26(5)

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