牛lncRNA H19过表达载体构建

摘要：

[目的]构建以及鉴定牛lncRNA H19过表达重组载体,为进一步探究lncRNA H19与miRNA 491和牛CART基因的互作关系奠定试验基础.[方法]NCBI获取牛lncRNA H19序列,经聚合酶链式反应(PCR)扩增,双酶切后载入pcDNA3.1-EGFP载体得到重组质粒.将pcDNA3.1-EGFP-H19、miRNA 491和CART 3种质粒共转染至HEK293 T细胞,在细胞内反复扩增过表达之后,利用荧光定量技术检测pcDNA3.1-EGFP-H19的表达量.[结果]结果显示pcDNA3.1-EGFP-H19载体序列正确;293 T细胞绿色荧光达50％,且强度适中,说明转染效果良好;lncRNA H19在293 T细胞中显著表达.[结论]pcDNA3.1-EGFP-H19载体构建成功,试验将为后续探究lncRNA H19与miRNA 491和CART基因之间的互作关系创造试验条件.

关键词：pcDNA3.1-EGFP-H19、荧光定量技术、CART、细胞转染

所属期刊栏目：49

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：山西省应用基础研究计划面上项目;山西农业大学校地合作项目;山西农业大学校地合作项目;山西省现代农业产业技术体系建设专项

在线出版日期：2023-04-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：41-45