基于NF-κB信号通路探究木犀草素对宫颈癌细胞增殖和凋亡的调控作用

摘要：

目的:探讨木犀草素对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响及其对核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的调控作用.方法:将HeLa细胞分为对照组、5 μmol/L木犀草素组、10 μmol/L木犀草素组、20 μmol/L木犀草素组和抑制剂组.5、10、20 μmol/L木犀草素组HeLa细胞分别经不同浓度(5、10和20 μmol/L)木犀草素处理24 h,对照组HeLa细胞不做处理.筛选出10 μmol/L为木犀草素最适浓度,然后将细胞分为对照组、10 μmol/L木犀草素组和抑制剂组[10 μmol/L木犀草素+2.5 μmol/L BAY 11-7082(NF-κB信号通路抑制剂)].采用5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)测定细胞增殖情况,平板克隆测定细胞克隆情况,Hoechst 33258测定细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR 测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA和细胞周期素D1(Cyclin D1)mRNA表达,蛋白免疫印迹(Western blotting)法测定Caspase-3、Cyclin D1、NF-κB和p-NF-κB蛋白表达.结果:10、20 μmol/L木犀草素组细胞增殖率、克隆形成率、Cyclin D1 mRNA和Cyclin D1蛋白相对表达量低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);10、20 μmol/L木犀草素组细胞凋亡数、Caspase-3 mRNA和Caspase-3蛋白相对表达量均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).因此本实验选择低浓度(10 μmol/L)木犀草素加入NF-κB通路抑制剂作为抑制剂组进行后续验证实验.抑制剂组细胞增殖率和克隆形成率低于10 μmol/L木犀草素组,差异有统计学意义(P<0.05).10 μmol/L木犀草素组Cyclin D1 mRNA、Cyclin D1蛋白、p-NF-κB蛋白相对表达量低于对照组,Caspase-3 mRNA和Caspase-3蛋白相对表达量高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);抑制剂组Cyclin D1 mRNA、Cyclin D1蛋白、p-NF-κB蛋白相对表达量低于10 μmol/L木犀草素组,Caspase-3 mRNA和Caspase-3蛋白相对表达量高于10 μmol/L木犀草素组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:木犀草素可能通过抑制NF-κB信号通路诱导HeLa细胞的凋亡并减弱其增殖能力.

关键词：宫颈癌、木犀草素、细胞增殖、细胞克隆、细胞凋亡、核转录因子-κB、信号通络

所属期刊栏目：29

分类号：R285.5(中药学)

在线出版日期：2023-07-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：22-27