黄芪甲苷配伍三七总皂苷对OGD/R大鼠脑微血管内皮细胞屏障功能的影响

摘要：

目的 观察黄芪甲苷(astragaloside Ⅳ,AST Ⅳ)配伍三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)对氧糖剥夺后再复糖复氧(oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)大鼠脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,rBMECs)屏障功能的影响.方法 原代培养并鉴定rBEMCs,取第 3 代rBMECs,采用AST Ⅳ与PNS高(100 μmol/L+60 μmol/L)、中(50 μmol/L+ 30 μmol/L)、低(25 μmol/L+15 μmol/L)剂量配伍预处理24 h,以OGD/R建立缺血再灌注损伤模型,同时设立对照组和模型组.CCK-8检测细胞存活情况,利用跨内皮细胞电阻(transendothelial electrical resistance,TEER)检测细胞屏障功能的改变,免疫荧光检测血脑屏障连接蛋白Occludin和ZO-1蛋白含量,Western blot检测黏附分子ICAM-1、VCAM-1 的蛋白表达及NF-κB-p65 的活化表达情况,ELISA检测细胞培养液中炎症因子TNF-α及IL-1β表达水平.结果 成功培养分离rBMECs,阳性表达vWF.与对照组比较,模型组细胞存活数量明显减少(P＜0.01),与模型组比较,AST Ⅳ与PNS不同剂量配伍均能提高rBMECs的存活率(P＜0.05,P＜0.01).与对照组比较,模型组TEER值、Occludin和ZO-1荧光强度显著降低(P＜0.01),与模型组比较,AST Ⅳ与PNS不同剂量配伍均能显著增高TEER值(P＜0.01)、增加Occludin和ZO-1 荧光强度(P＜0.05,P＜0.01).与对照组比较,模型组TNF-α、IL-1β、ICAM-1、VCAM-1、p-NF-κB-p65 表达显著增强(P＜0.01),与模型组比较,AST Ⅳ与PNS中高剂量配伍组TNF-α、IL-1β、ICAM-1、VCAM-1、p-NF-κB-p65 表达量下降(P＜0.01).结论 AST Ⅳ配伍PNS能够显著抑制NF-κB活化,降低细胞炎症因子的表达,增高OGD/R模型rB-MECs屏障功能,保护缺血缺氧后的脑组织.

关键词：大鼠脑微血管内皮细胞、脑缺血再灌注、黄芪甲苷、三七总皂苷、屏障功能

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分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;湖南省自然科学基金项目;湖南省卫健委科研项目;湖南省大学生创新创业训练计划项目;湖南中医药大学中西医结合一流学科开放基金项目;湖南中医药大学大学生创新创业训练项目

在线出版日期：2023-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1786-1792