基于转录组学探讨何首乌不同炮制品的肝细胞毒性作用机制

摘要：

目的 探讨何首乌(Polygonum Multiflorum,PM)炮制后降低肝毒性的作用机制.方法 通过使用生何首乌(raw Poly-gonum Multiflorum,RPM)与制何首乌(processed Polygonum Multiflorum,PPM)处理L02 肝细胞,采用CCK-8 与EdU试剂检测L02肝细胞的细胞活力与增殖能力;运用转录组学技术分析正常组、RPM、PPM组之间的差异基因,并对差异基因进行富集分析,在此基础上采用Western blot和免疫荧光验证相关通路上关键蛋白的表达水平.结果 CCK-8和EdU实验中发现,与正常组相比,RPM组能够显著抑制肝细胞的细胞活力与增殖能力(P＜0.01),与RPM组相比,PPM组的肝细胞活力与增殖能力明显升高(P＜0.01).RNA测序结果发现,与正常组相比,RPM组有3449个上调基因、3793个下调基因.与RPM组相比,PPM组有3788个基因上调、3515个基因下调.将正常组与RPM组的差异基因和RPM组与PPM组的差异基因进一步取交集,得到6854个共同差异基因;GO分析类结果显示主要参与细胞杀伤、细胞聚集、新陈代谢、生长等生物过程;KEGG富集分析结果显示,这些差异基因主要富集在内吞作用、溶酶体、自噬作用等细胞过程.Western blot与免疫荧光结果显示,与正常组相比,RPM组中自噬相关基因LC3蛋白水平显著上调(P＜0.01),P62蛋白水平显著降低(P＜0.01);与RPM组相比,PPM组中LC3 蛋白水平显著降低(P＜0.01),P62蛋白水平显著升高(P＜0.01).结论 何首乌炮制后能够降低肝细胞毒性,其机制可能与减少细胞自噬有关,为降低何首乌毒性提供了新的干预措施.

关键词：何首乌、炮制、自噬、肝毒性、转录组学

所属期刊栏目：43

分类号：R283(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;张志国《全国名老中医药专家传承工作室建设项目

在线出版日期：2023-07-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1028-1034