三种补肾方含药血清对衰老骨髓间充质干细胞成骨分化及Runx2表达的影响

摘要：

目的 探究3种补肾方(健骨二仙丸、六味地黄丸、金匮肾气丸)含药血清对衰老骨髓间充质干细胞(bone marrow mes-enchymal stem cells,BMSCs)成骨分化及Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor2,Runx2)表达的影响,研究3种补肾方治疗骨质疏松症的机制.方法 将40只SPF级SD大鼠随机分为空白对照组(等体积生理盐水)、健骨二仙丸组(75.9 g/kg)、六味地黄丸组(85.8 g/kg)及金匮肾气丸组(89.1 g/kg),每组10只,分别灌胃用于制备含药血清.建立对数增长的P3代BMSCs.500μmol/L 30％H2O2处理以建立氧化衰老BMSCs模型.cck-8法检测衰老BMSCs代谢活性.衰老BMSCs分为模型组、诱导组、空白血清组、健骨二仙丸含药血清组、六味地黄丸含药血清组、金匮肾气丸含药血清组,共6组.在诱导第4、8、12、16天,观察各组细胞形态学变化,Western blot法检测Runx2蛋白表达,RT-PCR法检测Runx2 mRNA相对表达量.结果 与正常BMSCs比较,H2O2处理后的BMSCs活性显著降低(P<0.05).对比模型组,诱导组和空白血清组衰老BMSCs在分化过程中,茜素红染色增多;对比诱导组及空白血清组,各含药血清组衰老BMSCs在分化过程中,茜素红染色增多;且除模型组外,各组随着时间推移,茜素红染色不断增加.在第4、8、12、16天,对比模型组,诱导组、空白血清组Runx2 mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05);对比诱导组、空白血清组,健骨二仙丸含药血清组、金匮肾气丸含药血清组Runx2 mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05).在第4、8、12天,对比诱导组,六味地黄丸含药血清组Runx2 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05).在第4、12、16天,对比空白血清组,六味地黄丸含药血清组Runx2 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05).结论 健骨二仙丸、六味地黄丸、金匮肾气丸均可促进Runx2的表达,并促进衰老BMSCs往成骨方向分化.

关键词：健骨二仙丸、六味地黄丸、金匮肾气丸、衰老骨髓间充质干细胞、成骨分化、Runt相关转录因子2

所属期刊栏目：43

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：湖南省自然科学基金科卫联合项目;田心义名中医工作室

在线出版日期：2023-02-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：53-58