联合抑制FLT3和p65表达对THP-1细胞增殖和凋亡的影响

摘要：

目的 探讨FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)小分子干扰RNA(siRNA)和p65siRNA联合抑制对THP-1细胞增殖、凋亡的影响及可能的机制.方法 使用FLT3 siRNA、p65 siRNA及FLT3 siRNA+p65 siRNA分别转染处于指数增殖期的THP-1细胞,细胞计数试剂-8检测细胞增殖,Annexin V-FITC/PI染色检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测FLT3、p65和核辅抑制子维甲酸/甲状腺受体沉默因子(SMRT)mRNA的表达,Western blotting检测p65和SMRT蛋白的表达水平,流式细胞术检测FLT3蛋白的表达.结果 使用FLT3 siRNA、p65 siRNA及FLT3 siRNA+p65 siRNA转染THP-1细胞后,细胞的增殖受抑制,生长曲线变平,缺乏指数增殖的特征;细胞的早期凋亡率显著升高(F=22.311,P＜0.001),以联合组最为明显;细胞出现G0/G1期至S期的阻滞,G0/G1期的细胞比例明显上升(F=32.705,P＜0.001),S期的细胞比例显著下降(F=42.611,P＜0.001),以联合组最为明显.RT-PCR、Western blotting及流式细胞术显示:FLT3 siRNA、p65 siRNA及联合组中FLT3 mRNA和蛋白表达均明显降低(FmRNA=22.311,P＜0.001;F蛋白=128.78,P＜0.001),以联合组作用最为明显;p65 siRNA及联合组中p65 mRNA和蛋白表达明显降低(FmRNA=88.911,P＜0.001;F蛋白=27.591,P＜0.001);p65 siRNA及联合组中SMRT mRNA和蛋白的表达均明显增高(FmRNA=7.736,P=0.005;F蛋白=6.123,P=0.009).结论 联合抑制FLT3和p65表达能够有效抑制THP-1细胞的增殖,诱导其凋亡,可作为肿瘤治疗的研究方向之一.

关键词：FMS样酪氨酸激酶3、p65、RNA干扰、细胞增殖、细胞凋亡

所属期刊栏目：35

分类号：R733.71(肿瘤学)

资助基金：河南省自然科学基金青年基金资助项目202300410403

在线出版日期：2022-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：284-288