BRMS1shRNA表达载体的构建及对卵巢癌细胞转移的影响

摘要：

目的 探讨乳腺癌转移抑制基因1( BRMS1)表达抑制对人卵巢癌细胞转移能力的影响及机制.方法 构建靶向BRMS1基因的短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体pGPU6/GFP/Neo-BRMS1,并转染人卵巢癌OVCAR3细胞,经G418筛选获得稳定转染株.采用实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测BRMS1 mRNA和蛋白的表达,采用黏附实验检测细胞的黏附能力,采用Tr-answell小室法检测细胞的体外侵袭和迁移能力,采用实时荧光定量PCR法检测基因沉默后miR-146a的表达.结果 经酶切和DNA测序证明重组载体构建成功.稳定转染BRMS1 shRNA后,OVCAR3细胞中BRMS1 mRNA和蛋白表达均受到明显抑制.BRMS1表达下调后,细胞的黏附、侵袭和迁移能力较对照组明显增强.干扰组细胞的miR-146a mRNA表达下调了(44.69±4.60)％.结论 干扰BRMS1基因的表达可促进卵巢癌细胞的黏附、侵袭和迁移,其机制可能与下调miR-146a的表达有关.

关键词：卵巢肿瘤、RNA干扰、乳腺癌转移抑制基因1、miR-146a

所属期刊栏目：24

分类号：R730.23;R737.31(肿瘤学)

资助基金：广东省科技厅项目2009B3060700080;广州市科技计划资助项目2010GN-E00221

在线出版日期：2012-03-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：471-476