RNAi沉默喉鳞癌Hep-2细胞株VEGF-C mRNA基因表达的实验研究

摘要：

目的 构建针对喉鳞癌细胞株Hep-2中血管内皮生长因子C(vascular endothelial growthfactor C,VEGF-C)的siRNA表达载体,研究载体介导的RNAi技术对喉鳞癌细胞株Hep-2中VEGF-C mRNA表达的抑制作用.方法 依据siRNA靶序列的设计原则,以VEGF-C为靶基因,同时随机组合出一条对照序列,分别合成2对编码短发卡结构的两条DNA序列,经退火合成互补DNA双链,克隆入siRNA表达载体pSuper-neo中,转化鉴定后进行PCR和DNA序列测定.用脂质体介导转染入喉鳞癌Hep-2细胞株,采用RTPCR方法检测细胞VEGF-C基因mRNA水平的变化.结果 成功构建发卡样VEGF-C siRNA真核表达载体;转染VEGF-C靶向siRNA(pSuper-neo-siV1)的Hep-2细胞,VEGF-C基因的表达水平较无关对照组pSuper-neo-siV2和转染空载体pSuper-neo的对照组显著下降.结论 成功构建载体介导的VEGF-C靶向RNA干扰重组体,并能有效抑制Hep-2细胞中VEGF-C mRNA表达.

关键词：喉鳞癌、VEGF-C、RNA干扰、Hep-2细胞株

所属期刊栏目：21

分类号：R739.65(肿瘤学)

在线出版日期：2008-07-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：99-102