长非编码RNA NEAT1通过miR-141-3p/EGFR参与瘢痕疙瘩形成的调控机制

摘要：

目的 探讨长非编码RNA NEAT1在瘢痕疙瘩中表达情况及参与瘢痕疙瘩形成的调控机制.方法 收集27例瘢痕疙瘩组织作为观察组,27例瘢痕疙瘩旁的正常皮肤组织作为对照组,采用实时荧光定量(RT-qPCR)检测其NEAT1、miR-141-3p的表达水平.取对数生长期的瘢痕疙瘩成纤维细胞(HKF)或293T细胞,随机分为空白对照组(Black组)、阴性对照组(NC组)、si-NEAT1组、miR-141-3p mimic组、si-NEAT1+OE-EGFR组、miR-141-3p mimic+OE-EGFR组.si-NEAT1组、miR-141-3p mimic组、si-NEAT1+OE-EGFR组、miR-141-3p mimic+OE-EGFR组细胞应用脂质体转染法分别进行si-NEAT1、miR-141-3p mimic、si-NEAT1+OE-EGFR、miR-141-3p mimic+OE-EGFR、阴性对照质粒转染,Black组细胞不作处理.RT-qPCR检测各组细胞中NEAT1和miR-141-3p的相对表达量.CCK-8法检测细胞增殖.使用生物信息学分析预测NEAT1与miR-141-3p及miR-141-3p与EGFR的结合位点,通过双荧光素酶报告基因实验确认NEAT1与miR-141-3p及miR-141-3p与EGFR的靶向作用.过表达EGFR的拯救实验,检测沉默NEAT1和上调miR-141-3p的细胞增殖抑制效应的变化.结果 与对照组比较,观察组中NEAT1表达升高(P<0.05),而miR-141-3p的表达异常下调(P<0.05);沉默NEAT1表达可以显著抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖,升高miR-141-3p的表达;NEAT1靶向负调控miR-141-3p;miR-141-3p靶向负调控EGFR;过表达EGFR可拯救沉默NEAT1和上调miR-141-3p表达对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的抑制作用.结论 NEAT1的表达在瘢痕疙瘩组织中异常升高,沉默NEAT1可通过miR-141-3p/EGFR轴降低瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖,抑制瘢痕疙瘩的形成和发展.

关键词：瘢痕疙瘩、增殖、长非编码RNA NEAT1、MicroRNA-141-3p、EGFR

所属期刊栏目：34

分类号：R622(整形外科学（修复外科学）)

在线出版日期：2023-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：659-663