高尔基体蛋白的基因克隆及原核表达

摘要：

目的 构建重组高尔基体蛋白的原核表达质粒并在大肠杆菌中诱导表达,为进一步研发肝癌诊断试剂奠定基础.方法 通过RT-PCR获得GP73目的片段,将其克隆入表达载体pET-28a,经酶切及测序鉴定后,在BL21菌株中经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用Western Blot鉴定.结果 扩增的片段大小与预期一致;pET-28a-GP73重组质粒通过酶切鉴定与DNA测序证实序列正确;诱导的蛋白用SDS-PAGE电泳和Western Blot检测,与预期相符可见一特异性条带.结论 成功获得GP73目的基因并构建了pET-28a-GP73原核表达载体,实现了该融合蛋白的可溶性表达.

关键词：GP73、克隆、原核表达、肝癌

所属期刊栏目：36

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金No.81401970北京市佑安医院肝病艾滋病基金No.BJYAH2013-1-005

在线出版日期：2015-10-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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