钝齿棒杆菌argR基因克隆、表达及其重组菌发酵产精氨酸的探讨

摘要：

目的 探讨N-乙酰鸟氨酸的转氨酶于钝齿棒杆菌当中,其精氨酸合成环节所起到的作用,并验证其酶学性质,从而为优化提高培养基的成分,以及发酵过程的工艺条件,和精氨酸的产量提供理论及实验依据.方法 于精氨酸的高产菌株中,使其钝齿棒杆菌的染色体(SYPA5-5)扩增,从而获取ACOAT的编码基因-argD,其全长为1176bp,编码氨基酸为390个,均于C.crenatum SYPA与Escherichia coli BL21(DE3)上成功表达.选择Ni柱进行亲和层析并纯化后,能够得到重组的蛋白比酶活可达到108.2U/g,并研究其酶学性质.再构建重组的钝齿棒杆菌,以加强其精氨酸的合成途径中ACOAT的蛋白表达量,同时对重组的菌产精氨酸予以发酵分析.结果 重组的钝齿棒杆菌同出发菌株进行对比,其胞内的ACOAT的酶活得到增强；并且重组菌中CCD1其精氨酸的平均产量达到了39.7g/L,其产酸最终提高了14.7％.结论 通过研究,不仅对高产精氨酸其重组基因菌工程的构建提供以理论依据,而且还具有非常重要的指导意义.

关键词：发酵、酶学性质、转氨酶、乙酰鸟氨酸、L-精氨酸、钝齿棒杆菌

所属期刊栏目：34

分类号：R517(传染病)

在线出版日期：2013-05-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：25-26,29