NMDA受体NR2D亚基在新生大鼠高氧性肺损伤中的作用及其机制

摘要：

[目的]探讨NMDA受体NR2D亚基在高氧致新生大鼠肺损伤中的作用及其机制.[方法]动物实验,将40只新生(出生12h内)SD大鼠随机分组为对照组(Con组)、高氧暴露后1d组、高氧暴露后7d组、高氧暴露后14 d组,每组各10只,高氧暴露组新生大鼠持续暴露在高氧(氧气含量≥95％)下3d建立高氧致新生大鼠肺损伤模型,高氧组新生大鼠分别在模型建立后1、7、14 d与对照组一起处死,苏木精-伊红染色(HE)、Masson染色观察各组大鼠肺病理损伤情况,进行Holfbauer评分,以羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)检测试剂盒检测肺组织中HYP含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NR2D亚基表达水平.细胞实验,将新生大鼠肺泡上皮细胞系RLE-6TN分为6组.空白对照组(Control组)、模型组、NR2D过表达质粒组、NR2D空载质粒组、NR2DsiRNA组、NR2DsiRNA阴性对照组.模型组及转染组细胞建立高氧损失模型,转染质粒及siRNA后,采用CKK-8法检测细胞增殖情况,用酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒检测细胞分泌的细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)及转化生长因子β(TGF-β)水平,Western blot检测NR2D亚基、E-cadherin、Vimentin蛋白表达水平.[结果]动物实验结果:与Con组相比,高氧暴露组新生鼠Holfbauer评分、HYP含量、NR2D亚基表达水平均升高且呈时间依赖性(P＜0.05).细胞实验结果:与Control组相比,模型组细胞相对增值率、E-cadherin蛋白表达降低(P＜0.05),NR2D亚基表达、TNF-α水平、IL-6水平、TGF-β水平、Vimentin蛋白表达升高(P＜0.05).与模型组相比,NR2D过表达质粒组细胞相对增值率、E-cadherin蛋白表达降低(P＜0.05),NR2D亚基表达、TNF-α水平、IL-6水平、TGF-β水平、Vim-entin蛋白表达升高(P＜0.05);NR2DsiRNA组细胞相对增值率、E-cadherin蛋白表达升高(P＜0.05),NR2D亚基表达、TNF-α水平、IL-6水平、TGF-β水平、Vimentin蛋白表达降低(P＜0.05);NR2D空载质粒组、NR2DsiRNA阴性对照组各指标无明显变化(P＞0.05).[结论]NMDA受体NR2D亚基在新生大鼠高氧性肺损伤的发生发展中起重要作用,主要通过下调其表达,保护高氧引起的肺泡上皮细胞损伤,降低细胞因子TNF-α、IL-6、TGF-β水平而实现.

关键词：大鼠/畸形、肺损伤、受体、谷氨酸

所属期刊栏目：36

分类号：R-332(医学研究方法)

资助基金：湖南省自然科学基金面上项目2018JJ2637

在线出版日期：2020-05-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2095-2100