TNFAIP1-shRNA慢病毒表达载体的构建与鉴定

摘要：

[目的]构建肿瘤坏死因子-α诱导蛋白-1 (TNFAIP1)基因短发卡 RNA (shRNA)慢病毒载体.[方法]根据人TNFAIP1 基因序列设计合成4条 shRNA,构建 shRNA表达质粒,将重组质粒转染至 293T细胞,应用 RT-PCR 检测各组 TNFAIP1 基因 mRNA 的表达水平,筛选出最有效的干扰靶序列,构建HSH018143-LVRH1P-RNAi慢病毒载体,并进行测序鉴定.将确定了的 TNFAIP1-shRNA-0S523409 转染至293T细胞,72 h后,观察绿色荧光表达情况,并测定病毒滴度.[结果]TNFAIP1-shRNA慢病毒表达载体高效转导入 293T细胞并稳定表达,测定其病毒滴度为5×108TU/mL.[结论]本研究成功构建了TNFAIP1基因 shRNA慢病毒表达载体,为研究TNFAIP1 在糖尿病视网膜病变中的作用奠定了实验基础.

关键词：肿瘤坏死因子α、生物合成

所属期刊栏目：35

分类号：R373(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：湖南省科技计划项目2015TP1020;怀化市科技计划重点项目2017X2102;湖南省教育厅一般项目17C1154;2017 年度湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划项目945

在线出版日期：2018-12-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1886-1888