EGFL7原核表达载体的构建及鉴定

摘要：

【目的】构建类表皮生长因子域7（EGFL7）原核表达载体，并诱导其表达、纯化及鉴定目的蛋白。【方法】以人肝癌细胞系 HepG2总RNA为模板，PCR扩增 EGFL7基因，克隆至原核表达载体pET‐21a（＋）中，转化大肠杆菌 BL21（DE3），IPTG 诱导表达。 His‐tag 磁珠纯化重组蛋白 EGFL7，SDS‐PAGE 鉴定。【结果】克隆目的基因序列正确，未发生碱基突变；重组表达质粒pET21a（＋）‐TRX‐EGFL7经双酶切鉴定构建正确；表达的重组蛋白相对分子量为80 kD ，与预期相符。【结论】成功在大肠杆菌BL21（DE3）中表达并纯化了EGFL7重组蛋白，为后续研究奠定了基础。

关键词：表皮生长因子/遗传学、大肠杆菌、基因扩增、遗传载体

分类号：R39;S43

资助基金：横向课题肿瘤抗原负载DC疫苗诱导的抗肿瘤作用11430101001261

在线出版日期：2014-12-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1889-1891