rAAV1-Luc病毒制备及体外转染大鼠心肌细胞的研究

摘要：

[目的]制备携带萤火虫荧光素酶基因的重组AAV1病毒(rAAV1-Luc),观察该病毒载体体外转染大鼠心肌细胞培养细胞.[方法]通过"一株载体细胞/一株辅助病毒"的双因素包装策略制备出rAAV1-Luc,AAV1-Luc按转染复数(MOI) 1×102、1×103、1×104、1×105、1×106、2×106 v.g./cell转染大鼠心肌细胞(H9C2细胞)96 h后,检测荧光素酶的表量,并在光镜下观察转染后细胞生长形态.[结果]成功的制备了重组AAV1-Luc;rAAV1-Luc能有效地转染H9C2细胞,转染后,细胞生长及形态正常;一定范围内,随着rAAV1-Luc转染细胞的MOI(即每个细胞感染的病毒基因组数)值增高,荧光素酶的表达水平也增高,MOI为1×106但表达量达到最高,更高的MOI(大于107)反而使荧光素酶的表达水平下降.[结论]本研究为开展rAAV1载体介导转移心肌细胞的基因治疗打下了良好的基础.

关键词：病毒/分离和提纯、心肌/细胞学、大鼠

所属期刊栏目：27

分类号：R373(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金30570073

在线出版日期：2010-11-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1401-1403