人可溶性肿瘤坏死因子受体1基因的克隆、表达及鉴定

摘要：

[目的]构建人可溶性肿瘤坏死因子受体1基因的重组质粒,进行原核表达.[方法]以Hela细胞的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增sTNFRl全编码区基因片段,构建舍有目的片段的T载体克隆及原核表达载体pMAL-c2x重组质粒亚克隆,经异丙基-β-D半乳糖苷酶(IPTG)诱导重组质拉菌表达sTNFR1,以淀粉树脂亲和层析法纯化重组蛋白,用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western-blotting对重组蛋白进行分析鉴定.[结果]经核苷酸序列测序和Western-blot鉴定,成功构建了人sTNFR1重组质粒基因工程菌,表达了具有sTNFR1免疫活性的融合蛋白.[结论]构建了人sTNFR1重组质粒克隆,获得了具有sTNFR1的免疫活性的融合蛋白,为今后的研究打下了基础.

关键词：受体、肿瘤坏死因子/分离和提纯、基因

所属期刊栏目：24

分类号：R392.11

资助基金：湖南省自然科学基金05JJ30178

在线出版日期：2007-12-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1633-1636