两种方法制备标准品的荧光定量PCR法检测细菌结果分析

摘要：

目前细菌定量检测提取细菌基因组多采用裂解法,此方法在提取基因组过程中部分基因组丢失.荧光定量PCR定量检测细菌常采用纯化的PCR产物制备标准品,但用这种标准品制备标准曲线没有考虑基因组提取过程中基因组丢失问题,检测结果偏低.本研究使用细菌直接计数法制备标准品,力争减少提取基因组过程中部分基因组丢失造成的误差.方法 脆弱类杆菌作为试验菌株,用细菌直接计数法和纯化PCR产物制备标准品,检测用细菌计数法获得的细菌基因组,用统计学软件分析两种方法得到的检测结果.结果 用两种不同的标准品作荧光定量PCR检测1000个细菌基因组μL-1的标本,细菌计数法制作标准品测得的结果是763.8个细菌基因组μL-1,普通PCR产物制作标准品测得的结果是112.9个细菌基因组μL-1,统计软件SPSS10.0分析结果表明,使用两种不同的标准品,荧光定量PCR检测结果差别显著(p＜0.05).结论 使用细菌直接计数法制备标准品比用PCR产物制备标准品作荧光定量PCR检测细菌标本的结果更接近实际结果.

关键词：荧光定量PCR、标准品、直接计数法

所属期刊栏目：18

分类号：R1(预防医学、卫生学)

资助基金：河南省科技攻关项目0523031700

在线出版日期：2007-04-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1-3