10.3969/j.issn.1006-8414.2006.02.006
河南省三株人源隐孢子虫分离株鉴定
目的隐孢子虫病是一种人兽共患寄生虫病,在艾滋病病人和儿童中的感染率可分别高达48%和17.5%,可导致严重的水样腹泻甚至危及生命,免疫功能正常者也能感染出现急性自限性腹泻.本文通过不同软件对三株人源隐孢子虫分离株进行种类鉴定.方法参照Xiao L H 1999年发表的资料合成隐孢子虫18S rDNA特异性引物(上游引物:5'-AACCTGGTTGATCCTGCCAGTAGTC-3',下游引物:5'-TGAGCCTTCTGCAGGTTCACCTACG-3',由大连宝生物工程技术公司合成.),PCR扩增,产物测序、序列分别用Paup4.0、 Phylip3.6、 DNAstar4.0等软件分析并与12株隐孢子虫相应序列进行同源性分析,绘制了系统发育进化树,分析鉴定.1、2号株采自非免疫抑制病人,3号株采自免疫抑制病人.结果①三株隐孢子虫均能扩增出1700bp左右的目的片段.②构建系统发生树,用DNAstar4.0软件进行分析:1与2号株的同源性为99.8%,1和2号株与AF108864 C.parvum-cattle的同源性分别为99.5%和99.3%,与AF112569 C.hominis进化关系较远.3号株与AF112574 C.meleagridis(火鸡源C.meleagridis)的同源性为99.8%,3号株与C.suis (AF108861)的同源性为98.9%,而与AF108864 C.parvum-cattle、AF112569 C.hominis、AF108865 C.parvum(Homo sapiens)、AY642591 C.muris、AB210854 C.canis、AF108862 C.felis等均不处于同一进化枝,亲缘关系较远.利用PAUP4.0、Phylip3.6的方法与DNAstar4.0软件分析的结果基本一致.结论1和2号分离株均为C.parvum牛基因型,3号分离株是C.meleagridis(火鸡隐孢子虫).本文结果为深入研究人隐孢子虫病的分子流行病学打下基础.
隐孢子虫、18S rDNA、PCR
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R531.3(寄生虫病)
2006-05-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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