人细小病毒B19VP1基因片段原核表达载体的构建及其表达

摘要：

目的克隆人细小病毒B19 VP1基因片段,构建其重组克隆载体和表达载体,并诱导表达.方法利用聚合酶链反应(PCR)和分子克隆技术,将B19病毒VP1基因片段扩增后,构建pGEM-T-easy克隆载体;经PCR筛选后,亚克隆于pGEX-4T-1表达载体中,并转化至BL21感受态菌;经诱导剂异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并以免疫印迹法对表达蛋白进行鉴定.结果扩增出一条约801bp的基因片段,PCR鉴定结果的与预期结果一致.经IPTG诱导,VP1融合蛋白在大肠杆菌中得到成功表达,PAGE上出现相对分子量约为54KD的一条新生蛋白带,经蛋白印迹验证为表达蛋白B19VP1.薄层扫描现示,表达产物占菌体总蛋白的27.4%.结论获得人细小病毒B19VP1基因片段的原核表达载体及其产物,对进一步研究其纯化及B19疫苗有重要意义.

关键词：人细小病毒B19、VP1基因片段、克隆、表达

所属期刊栏目：15

分类号：R383.12(医学寄生虫学)

资助基金：河南省卫生厅科技创新项目

在线出版日期：2005-03-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：330-332,338