大蒜谷胱甘肽硫转移酶基因AsGST的克隆及其对盐胁迫的响应

摘要：

为了解大蒜GST基因及其编码的蛋白质的结构特征,分析GST基因在不同组织及盐胁迫条件下的表达特性,采用RT-PCR方法克隆得到大蒜苍山四六瓣GST基因,采用BLAST、DNAMAN、ProtParam、MEGA5、Swiss-Model等生物信息工具分析其序列特征,利用实时荧光定量PCR方法,分析AsGST基因在大蒜根、鳞茎和叶片中的表达差异及其对盐胁迫的响应情况.结果 表明,大蒜AsGST基因全长663bp,编码220个氨基酸,推测蛋白质分子质量为25.58 kDa,理论等电点为6.55,属于tau类GST家族.植物GST的序列相似性较低,但在结构上相对保守.在蛋白的N端含有谷胱甘肽特异结合位点(G位点),C端含有可变性较大的疏水底物结合位点(H位点),在进化关系上AsGST与茄科作物较近.空间结构分析表明,大蒜GST的三级结构由3个β-折叠和11个α-螺旋构成.实时荧光定量PCR显示,苍山四六瓣中GST基因在根中的表达量最高,其次是叶,在鳞茎中的表达量较低,具有明显的组织特异性.盐胁迫处理4h后,各组织内AsGST基因的表达量均升至最高,说明该基因可响应盐胁迫逆境信号.本研究结果为进一步研究大蒜GST基因的功能奠定了一定的理论基础.

关键词：大蒜、盐胁迫、AsGST基因、基因克隆、表达分析

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资助基金：江苏省自然科学基金青年基金项目BK20170460;淮阴工学院博士科研启动基金Z301B16531;教育部新世纪优秀人才支持计划项目NCET-11-0670;江苏省自然科学基金杰出青年基金BK20130027

在线出版日期：2019-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1088-1095