玉米单倍体胚性愈伤的诱导与鉴定

摘要：

为建立一套适合玉米单倍体胚性愈伤培养和快速筛选体系,以单倍体诱导系MT-1为父本,18-599红为母本进行单倍体诱导,设置暗培养、全光照培养和光暗周期培养3种光照培养方式,均分别培养0、1、5、10、20、40 h后,观察幼胚形态和颜色.结果 表明,自交系18-599红的单倍体和二倍体幼胚均能正常诱导形成胚性愈伤组织;不同光照培养方式对紫色(二倍体)愈伤率的检出效果依次为光培养＞光暗周期培养＞暗培养.通过光照筛选的方法可在早期鉴定愈伤组织,其二倍体愈伤的筛选率在培养20 h时可达68％,40 h时为71％,剔除了大部分非单倍体愈伤,综合分析确定光照强度为2 000 lx、20C处理20 h为最适光照筛选处理.染色体压片技术获得的拟单倍体愈伤中有二倍体愈伤的检出,但经流式细胞仪检出获得的拟单倍体愈伤再经染色体压片检测,无二倍体愈伤,表明流式细胞仪检测单倍体愈伤的准确性高于染色体压片技术.通过光照初步筛选结合流式细胞仪的精确鉴定,迅速从3 000个单倍体愈伤中获得110个单倍体愈伤,单倍体愈伤率3.67％.本研究结果为以玉米单倍体愈伤为转基因受体,快速获得转基因植株提供了一定的技术支撑和理论参考.

关键词：玉米、单倍体、愈伤组织、筛选方式

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资助基金：福建省科技重大专项2015NZ0002-3;2017年成都市第三批应用技术研究与开发,福建省公益类科研院所基本科研专项2017R1026-1;福建省农业科学院科技创新团队STIT2017-2-6

在线出版日期：2019-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：640-646