基因枪法介导的辣椒花药遗传转化技术研究

摘要：

为建立基因枪法介导的辣椒遗传转化体系,以小孢子胚胎发生率较高的辣椒品种L5的花药为受体,利用基因枪法将绿色荧光蛋白(GFP)基因导入L5花药小孢子中,并进行花药培养诱导小孢子胚胎发生,探讨基因枪法转化辣椒花药小孢子的适宜参数.结果表明,辣椒小孢子处于单核靠边期的花药在9cC下暗培养4d时为最佳受体;CaMV35S启动子能启动GFP基因在辣椒花药培养的小孢子胚胎中表达;基因枪各轰击参数对小孢子胚胎发生有显著影响(P＜0.05),随着基因枪轰击次数和轰击压力的增加以及轰击距离的减小,小孢子胚胎发生数量逐渐减少;最适的轰击参数为基因枪轰击2次、轰击压力1 350 psi和轰击距离9 cm,此时获得的转化胚胎数量最多;在最适的轰击参数下辣椒花药小孢子的平均转化效率为4.2％;体式荧光显微镜下共检测到14个转化胚胎.本研究结果为进一步建立基因枪介导的辣椒花药稳定遗传转化体系提供了一定的理论基础和技术支撑.

关键词：辣椒、花药培养、小孢子、基因枪法、GFP

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资助基金：国家重点研发计划2017YFD0101904;北京市农林科学院科技创新能力建设专项KJCX20170102-14;北京市农林科学院蔬菜种质创新与新品种选育院级科技创新团队JNKYT201601

在线出版日期：2018-12-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2081-2087