梅PmmiR319a与靶基因PmTCP2的验证与表达分析

摘要：

为验证PmmiR319a与PmTCP2基因的靶标关系,并研究PmmiR319a在梅花芽发育过程中的作用,本研究以梅品种‘大嵌蒂’为试验材料,克隆梅PmmiR319a前体序列及其靶基因PmTCP2,采用5'RACE技术对两者之间的靶标关系进行验证,并进一步分析在花芽发育过程中的表达‘模式.结果表明,梅PmmiR319a前体序列含有茎环结构,通过序列比对和系统发育分析发现,不同物种的miR319a前体序列的茎环发卡结构和成熟体区域表现出较高的保守性.梅PmTCP2基因全长1 500 bp,编码499个氨基酸.荧光定量PCR分析结果表明,PmmiR319a在梅花发育的前期表达量高,而PmTCP2在梅花发育的中期和后期表达量较高,PmmiR319a与预测靶基因PmTCP2的表达模式呈负相关,表明二者存在负调控的关系,与预测的靶标关系一致.RLM-5'RACE技术验证结果表明,PmmiR319a对其靶基因PmTCP2的mRNA进行了切割,切割位点位于第10和第1 1个碱基之间.由此可知,PmmiR319a通过调控靶基因PmTCP2影响花的发育.本研究结果为阐明梅花中miR319a的功能提供了一定的理论依据.

关键词：梅、miR319a、TCP2、荧光定量PCR、RLM-5’RACE

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资助基金：江苏省六大人才高峰项目NY-068;江苏省自然基金BK20151426、BK20150679

在线出版日期：2018-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1908-1916