节瓜CqWRKY1基因的遗传转化

摘要：

为建立和优化节瓜的遗传转化体系,并高效地完成CqWRKY1基因的遗传转化,本研究以节瓜A39为材料,通过RT-PCR技术克隆了节瓜CqWRKY1基因,采用Gateway同源重组法构建了pEarleyGate101-CqWRKY1超表达载体,以节瓜子叶节为外植体,利用农杆菌介导的遗传转化法进行转化.结果表明,子叶节不定芽诱导的最适培养基为MS+0.5 mg·L-16-BA+1 mg·L-1 ABA,诱导率可达76.17％;生根的最佳培养基为1/2MS+0.5 mg·L-1 IAA;农杆菌侵染的最佳条件为农杆菌浓度OD600为0.3、侵染时间为10 min、共培养时间为3d;最佳的抑菌抗生素为500 mg·L-1的头孢霉素.本研究在181株拟转基因组培苗中共得到76株阳性T0转基因组培苗,其中共有37株移栽成活.PCR结果表明,CqWRKY1已成功整合到37株转化植株的基因组中.本研究结果为进一步研究CqWRKY1基因的功能奠定了一定的理论基础.

关键词：节瓜、Cq WRKY1、农杆菌介导、遗传转化、离体培养

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资助基金：广东省自然科学基金重点项目2015A030311008;广东省科技计划项目2016B020201005;公益性行业农业科研专项201503110-07;广州市科技计划项目201610010102

在线出版日期：2018-06-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：1060-1069