青稞OMT1基因克隆及原核表达分析

摘要：

类黄酮O-甲基转移酶(FOMT)是一种在植物甲基化黄酮代谢合成中有着重要作用的酶,但在中国青藏高原的特色作物青稞中研究较少.为了更好了解该酶及编码基因在青稞中的生理功能及作用,以高总黄酮青稞品系94-19-1为材料,通过RT-PCR扩增、克隆得到青稞OMT1基因的ORF序列.结果表明,该基因ORF长1 071 bp,编码356个氨基酸,预测蛋白分子量为38.65 KDa,等电点为5.33.序列比对分析发现,所克隆的基因与NCBI数据库收录的大麦HvOMT1基因有99.44％的一致性,氨基酸序列存在5个残基差异,编码的蛋白序列具有OMT蛋白家族典型的保守结构域.进一步将该基因连接到原核表达载体转化大肠杆菌,最终成功将该基因所编码的蛋白在大肠杆菌诱导表达,并利用亲和层析柱分离技术,将该表达蛋白进行了纯化.这为进一步研究该酶蛋白功能和选育高品质青稞品种奠定了基础.

关键词：青稞、类黄酮O-甲基转移酶、分子克隆、原核表达

所属期刊栏目：31

分类号：TS2;O4

资助基金：国家现代农业产业技术体系大麦青稞体系建设专项基金CARS-05

在线出版日期：2018-02-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：2314-2322