超声辅助竹节虾头酶解及抗氧化肽分离研究

摘要：

为了实现竹节虾加工副产物的高值化利用,以竹节虾加工废弃物中的虾头副产物为原料,以水解度和DPPH清除率作为评价指标,采用中性蛋白酶酶解,通过响应面法优化超声辅助酶解工艺,并依次通过超滤、凝胶层析色谱和反相高效液相色谱等分离方法,从竹节虾虾头酶解产物中分离制备抗氧化肽,采用超高压液相色谱串联质谱联用技术对肽的结构进行表征.结果表明,在中性蛋白酶添加量为3 000 U.g-1、pH值7.0条件下,最佳超声辅助酶解工艺参数为超声时间41 min,超声温度55℃,超声频率22 kHz,料液比1∶9(w/v),在此条件下获得的酶解产物DPPH清除率达69.50％.当水解时间为0.5～2.5h时,超声辅助酶解的酶解产物水解度和DPPH清除率比非超声辅助酶解工艺分别高17.95％和18.83％,该工艺缩短了酶解时间,节约了能耗.酶解产物经超滤初步分离发现,相对分子质量在＜3kDa(SHP4)的组分具有显著的抗氧化活性.用凝胶层析法进一步分离纯化SHP4组分后得到4个峰,其中SHP4-Ⅱ的DPPH清除率最高;SHP4-Ⅱ通过反相高效液相纯化后也得到4个主要肽峰,在多肽含量为1.5 mg·mL-1时,SHP4-Ⅱ-4的DPPH清除率最高,达到85.69％,并且具有较好的分离度,质谱分析发现,该抗氧化肽的结构为Gly-Asn-Gly-Leu-Pro (455.99 Da).本研究结果为虾肽抗氧化保健食品的研发提供了一定的科学依据.

关键词：竹节虾、超声波、酶解、抗氧化肽、分离纯化

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分类号：R6 ;TS2

资助基金：浙江省科技计划项目2017C32102;舟山市科技局项目2015C41016;普陀区科技计划项目2014ZD205

在线出版日期：2017-08-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：1556-1566