烟草NtMTPC4启动子的克隆与缺失分析

摘要：

组织特异性启动子是基因工程研究及实际应用中的重要工具.为了研究烟草NtMTPC4启动子的表达特性,采用实时荧光定量PCR方法分析烟草金属耐受蛋白C4(MTPC4)基因NtMTPC4在烟草不同组织中的表达模式,并利用PCR技术克隆得到NtMTPC4的上游启动子NtMTPC4-P.根据调控元件的分布对NtMTPC4-P进行不同程度的缺失,获得了NtMTPC4-P1、NtMTPC4-P2和NtMTPC4-P3缺失体;构建全长NtMTPC4-P和不同缺失体的植物表达栽体,并通过花序浸染法转化拟南芥,对获得的转基因拟南芥进行GUS组织化学染色分析.结果表明,NtMTPC4基因的表达具有组织特异性,其在花中的表达量最高.NtMTPC4-P全长2 287 bp,含有CAAT-box、TATA-box、GTGANTG10和POLLEN1LELAT52等顺式作用元件和调控元件.GUS组织化学染色结果表明,全长启动子NtMTPC4-P和不同缺失体都能特异性地驱动GUS基因在转基因拟南芥花粉中的表达.本研究结果为通过基因工程技术在花粉中特异表达目的基因提供了新的调控元件.

关键词：烟草、NtMTPC4启动子、花粉特异性启动子、克隆、缺失分析

所属期刊栏目：31

分类号：S33;R73

资助基金：国家自然科学基金31500205;西南科技大学博士研究基金14zx7153;四川省生物质资源利用与改性工程中心项目13zxsk02

在线出版日期：2017-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1282-1289