燕麦AsKUP1的克隆与功能分析

摘要：

植物钾离子转运蛋白中的Na+不敏感性KUP/HAK/KT转运蛋白对植物耐盐胁迫起着重要作用.为了阐明钾离子转运蛋白基因AsKUP1在燕麦中响应盐胁迫的表达模式和鉴定其生物学功能,从燕麦中克隆了AsKUP1,利用RACE方法获得AsKUP1全长序列,并对其进行生物信息学分析;构建了pCAMBIA1301-AsKUP1植物过表达载体,转化拟南芥,并运用实时荧光定量PCR方法分析AsKUP1在拟南芥中的表达情况.结果表明,AsKUP1全长2 951bp,包含2 334bp的ORF序列,预测编码777个氨基酸,等电点为8.55,分子量为87.0kD.序列分析表明,AsKUP1与山羊草和小麦KUP/HAK/KT家族亲缘关系较近,预测该蛋白有14个疏水跨膜结构域,位于细胞质膜的概率较大.此外,盐胁迫下,T2转基因种子萌发率为57％,野生型为43％;经潮霉素筛选分离比为3:1的2个转基因株系后代T3转基因株系根长分别是野生型的1.46倍和1.34倍,T3转基因植株鲜重、干重分别是野生型的1.56倍和1.44倍,Na+含量无显著差异,而K+含量为野生型的1.25倍,说明AsKUP1的表达提高了拟南芥植株的耐盐性.本研究结果为揭示钾离子转运蛋白家族基因AsKUP1在植物中的耐盐机制和通过转基因技术提高植物耐盐能力奠定了基础.

关键词：燕麦、AsKUP1、耐盐、基因克隆、功能分析

所属期刊栏目：31

分类号：X17;S56

资助基金：国家自然科学基金项目31560357;内蒙古自治区科技创新团队项目,内蒙古自治区杂粮工程技术研究中心

在线出版日期：2017-05-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1061-1069