10.11869/j.issn.100-8551.2016.05.0926
紫外分光光度法测定啤酒大麦籽粒脂氧合酶活力的研究
为了明确影响啤酒大麦籽粒脂氧合酶(LOX-1)活力的参数,以甘啤4号啤酒大麦籽粒为研究对象,采用紫外分光光度法探究底物浓度、提取缓冲液pH、反应体系缓冲液pH提取时间、粗酶加入量:底物加入量等对LOX-1活力的影响.结果表明,LOX-1活力随底物浓度的增加表现为先增加后减小的趋势,当底物浓度达到0.30mmol·L-1时,LOX-l活力显著高于其它处理;随提取缓冲液pH的增加,LOX-1活力表现为双峰变化趋势,且在pH值5.0处,酶活力为9.85U·g-1,显著高于其它处理;粗酶提取时间为30min时,LOX-1活力显著高于其它处理,低于或者高于30min,酶活力均呈现降低趋势;LOX-1活力随反应体系pH的增加,表现为双峰变化趋势,当pH值为6.4时,酶活力最大,且与其它处理间存在显著差异;在其它条件不变,粗酶加入量为50μL的情况下,增加底物加入量,LOX-l活力表现为先增加后减小的趋势,且底物加入量为200.μL时,酶活力显著高于其它处理.最终确定紫外分光光度法的测定参数:粗酶提取时间为30min,底物浓度为0.25mmol·L-1,提取液和反应体系缓冲液分别为pH值5.0醋酸盐缓冲液与pH值6.4磷酸盐缓冲液,粗酶加入酶量:底物加入量为1:4.研究结果为紫外分光光度法在啤酒大麦籽粒LOX-1活力测定中的应用提供了参考.
啤酒大麦、脂氧合酶、紫外分光光度法、最适条件
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现代农业产业技术体系建设专项CARS-05“十二五”兵团重点领域科技攻关专项2011BA002,石河子大学科学技术研究发展计划“动植物育种专项计划”gxja2011-yz05
2016-08-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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