高温胁迫下水稻灌浆初期籽粒的全长cDNA文库构建及其分析

摘要：

为克隆水稻灌浆期耐热性相关基因的全长cDNA序列,本研究以水稻灌浆期耐热纯系XN0437T和热敏感纯系XN0437S为材料,于灌浆初期(扬花后第8天)进行38.0/33.0±0.5℃(白天/夜间)温度处理,设3次高温处理重复;高温处理结束时,取耐热和热敏感纯系籽粒提取总RNA,3次高温处理样品的总RNA等量混合后,利用SMART技术合成cDNA双链,经琼脂糖凝胶电泳分离后,分5个区段回收大小不同的cDNA,分别克隆到pGEM-T Easy Vector载体,构建了5个全长cDNA亚文库并分析了这些亚文库的质量.结果表明:5个全长cDNA亚文库共获得7 974个阳性克隆,平均插入片段大于1.0kb,整个文库的全长率约为75％;插入片段大于0.5 kb的亚克隆文库的滴度均大于4.6×106pfu·mL-1、重组率大于98.1％±0.79％.为获得全长cDNA文库克隆目的基因的全长奠定了基础.

关键词：水稻、灌浆期、籽粒、高温胁迫、全长cDNA文库

所属期刊栏目：29

资助基金：国家自然科学基金项目31160272,江西省自然科学基金项目2010GQN0804,江西省青年科学基金重点项目20133ACB21004

在线出版日期：2015-10-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1437-1443