2株萎缩芽孢杆菌铬去除差异基因的PFGE分析

摘要：

为寻找2株萎缩芽孢杆菌与铬去除相关的差异基因,探索PFGE技术在寻找差异基因方面的可行性,本研究以萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)ATCC 9372菌株和Ua菌株为材料,分别考察2株菌对Cr(Ⅵ)的耐受性和去除能力;采用PFGE技术进行基因组酶切片段分析,以期获得差异基因;利用转基因技术对得到的差异基因Cr(Ⅵ)去除功能进行验证.结果表明:2株菌在48h时菌体生长和对Cr(Ⅵ)的去除率达到最大值,ATCC 9372菌株的生长状况和Cr(Ⅵ)去除能力明显高于Ua菌株;基因组通过内切酶EcoRI-HindⅢ组合酶切后,PFGE分析得到了一条3kb左右的差异条带,测序比对结果表明该序列含有YthA基因和YtiB基因;差异序列的酶切位点与内切酶组合一致,PCR结果表明差异序列只存在于Ua菌株中,转基因菌株ATCC 9372-YtiB的Cr(Ⅵ)去除率下降了约12％,表明YtiB基因与Cr(Ⅵ)的去除负相关.本研究利用PFGE技术成功发现2株萎缩芽孢杆菌的铬去除差异基因,经验证该技术可行性高,为寻找差异基因提供了一种新途径.

关键词：铬污染、萎缩芽孢杆菌、脉冲场凝胶电泳、基因差异分析、YtiB基因

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资助基金：国防科技项目14zg6101,国家“973”计划2014CB846003,四川省生物质资源利用与改性工程中心项目13zxsk02

在线出版日期：2015-07-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1052-1060