水稻OsHsfA7基因RNA干扰载体的构建及遗传转化研究
为研究水稻热激转录因子基因OsHsfA7的功能及其在水稻耐热育种方面的应用价值,本文通过构建水稻OsHsfA7基因RNA干扰载体获得功能抑制变异材料,从反向遗传学进行基因的功能分析.扩增OsHsfA7 cDNA 3'编码区470bp片段,分别以反向和正向插入到中间载体pBSK连接的GUS片段两侧,然后将得到的RNA干扰片段克隆到改造的植物表达载体p1301M,构建以CaMV35S启动子驱动表达的水稻OsHsfA7基因RNA干扰表达载体.将该载体转入根癌农杆菌EHA105后,采用农杆菌介导法进行了水稻日本晴品种的遗传转化,获得了23株具有潮霉素抗性的转基因植株,其中12株经GUS染色呈蓝色并且DNA检测10株已插入目的片段,RNA检测其中6株OsHsfA7基因的表达水平下降甚至未检出.结果说明本研究构建的OsHsfA7基因RNA干扰载体对该基因表达沉默是有效的.
水稻、热激转录因子基因HsfA7、干扰载体
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S5(农作物)
国家自然科学基金30870206;国家重点基础研究发展规划973计划2007CB116207;教育部高等学校博士学科点专项科研基金20050537001;湖南省教育厅青年基金098045
2010-06-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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