铁蟹过敏原的分离、鉴定和快速纯化

摘要：

应用免疫印迹(Westem blot)的方法鉴定铁蟹过敏原组分,然后利用电泳洗脱的方法快速纯化主要过敏原.取磷酸盐缓冲液制备的铁蟹肉浸出液,经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,测定各组分的相对分子量,然后利用18例蟹过敏患者的血清进行免疫印迹,鉴定出主要和次要过敏原,利用普通垂直电泳槽快速洗脱主要过敏原蛋白,并鉴定活性.结果显示,SDS-PAGE显示铁蟹肉可辨条带有16条,相对分子质量在16.5～168kD之间.Western blotting结果表明,铁蟹肉浸出液共有10条过敏条带,其中相对分子质量为76kD的蛋白条带,阳性反应率为100%,纯化后获取了76kD的主要过敏原,经过免疫印迹鉴定其具有免疫活性.表明相对分子质量76kD的组分为铁蟹主要过敏组分,快速电洗脱可以纯化相对分子量为76kD的过敏原组分.

关键词：铁蟹肉、过敏原、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫印迹、蛋白质纯化

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分类号：S9(水产、渔业)

资助基金：国家自然科学基金30470999;农业部农业公益性行业科研专项经费项目核技术农业应用资助200803034

在线出版日期：2010-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：839-842