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根癌农杆菌介导转褪黑素基因草莓的获得

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为建立根癌农杆菌介导的草莓褪黑素基因高效遗传转化体系,以草莓品种"早红"叶片和叶柄为外植体,优化了影响根癌农杆菌遗传转化的因素,包括农杆菌菌液浓度、侵染时间、共培养时间和预培养时间等,建立了适宜草莓"早红"的农杆菌遗传转化体系.结果表明,"早红"草莓适宜的转化条件是:外植体的最适预培养时间为2~3 d,农杆菌侵染的最佳菌液浓度为OD_(600)0.3~0.5,最适侵染时间为15min,最适共培养时间为3 d.在此基础上,通过根癌农杆菌介导法将褪黑素合成关键酶N-乙酰转移酶(AANAT)和羟吲哚-O-甲基转移酶(HIOMT)基因AANAT和HIOMT转入草莓基因组,并对获得的抗性植株进行PCR和PCR-Southern blot检测分析,结果表明外源基因已经整合进草莓基因组中.RT-PCR分析证明外源基因已经在转录水平表达.

农杆菌、褪黑素、草莓、遗传转化

23

S6(园艺)

国家自然科学基金30671082;陕西省自然科学基金2006C102;西北大学西部资源生物与现代生物技术重点实验室开放基金

2010-03-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共7页

766-772

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