水稻几丁质酶的原核表达、复性及体外抑菌活性的研究

摘要：

利用RT-PCR反应,从纹枯菌诱导的水稻叶片cDNA中克隆了1个水稻几丁质酶基因RC7的全长编码序列(ORF).通过亚克隆方法,RC7与原核表达载体pGEX-4T-1上的GST融合,构建成GST-RC7重组蛋白的原核表达载体pGST-RC7,然后,将其转化到大肠杆菌细胞中.经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,获得了以包涵体形式高效表达的GST-RC7.经过洗涤、溶解(变性)、复性及纯化等处理,包涵体中GST-RC7蛋白得到溶解、复性和纯化.纯化的复性GST-RC7蛋白具有几丁质酶活性.对6种重要作物病原真菌进行体外抑菌活性分析的结果表明,RC7可显著抑制水稻纹枯病菌、小麦纹枯菌、小麦赤霉菌、棉花黄萎菌、烟草赤星菌的菌丝生长,说明RC7可作为上述植物病害抗性基因育种的重要基因.

关键词：水稻几丁质酶基因、表达、蛋白质纯化、复性、体外抑制真菌活性

所属期刊栏目：23

分类号：S5(农作物)

资助基金：国家转基因生物重大专项课题2008ZX08002-001;重点课题

在线出版日期：2009-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：369-374