突变型 TDP-43（A315T）蛋白诱导S H-SY5Y 细胞凋亡的机制研究

摘要：

目的：探讨TDP‐43（A315T ）突变蛋白诱导SH‐SY5Y细胞凋亡的机制。方法采用真核细胞转染技术将Flag‐TDP‐43（w t）及Flag‐TDP‐43（A315T ）质粒转入SH‐SY5Y细胞，通过Western blot检测 TDP‐43截短型表达及自噬水平的变化；PI／Annexin‐V‐FITC检测细胞凋亡率；单丹磺酰尸胺（monodansylcadaverin ，MDC）染色检测细胞自噬空泡的变化。结果与转染Flag‐TDP‐43（wt）组相比，过表达Flag‐TDP‐43（A315T）细胞截短型片段Flag‐TDP‐35及Flag‐TDP‐25表达明显上调，下调细胞内源性Beclin 1水平及LC3Ⅱ／LC3Ⅰ的比值降低。与转染Flag‐TDP‐43（wt）组相比，过表达Flag‐TDP‐43（A315T）诱导SH‐SY5Y细胞自噬性小泡聚集明显减少。与转染Flag‐TDP‐43（wt）组相比，过表达Flag‐TDP‐43（A315T）后SH‐SY5Y细胞凋亡率增加。结论 TDP‐43（A315T ）突变蛋白可通过增加其截短型表达及抑制细胞巨自噬水平诱导SH‐SY5Y细胞凋亡。

关键词：TDP-43(A315T)、SH-SY5Y细胞、自噬、凋亡

分类号：R329.2+5(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金项目81100949

在线出版日期：2014-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：26-28