山柰酚激活p38MAPK信号通路促进人牙周韧带间充质干细胞的迁移和成骨细胞分化

摘要：

目的:基于p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路,探讨山柰酚(KFR)对人牙周韧带间充质干细胞(HPL-MSC)迁移能力和成骨细胞分化能力的影响.方法:体外培养HPL-MSC细胞系,根据细胞处理方式不同,分为0 μmol/L KFR组、0.01 μmol/L KFR组、0.1 μmol/L KFR组、1 μmol/L KFR组、10 μmol/L KFR组、100 μmol/L KFR组、p38 MAPK抑制剂SB203580组(SB203580组)、0.1 μmol/L KFR + SB203580组(0.1 + SB203580组),药物处理24 h或48 h.药物处理48 h后,进行成骨细胞诱导培养7 d.采用划痕实验、Transwell检测细胞迁移和侵袭能力,Western blotting评估成骨分化能力和p38 MAPK的活化水平,细胞计数试剂盒-8(CCK8)检测细胞活力.结果:与0 μmol/L KFR组相比,处理24 h后的1 μmol/L KFR组细胞活力较高,而100 μmol/L KFR组细胞活力较低;处理48 h后的0.01、0.1、1 μmol/L KFR组细胞活力较高,而在100 μmol/L KFR组细胞活力较低.因此,选择0、0.01、0.1、1 μmol/L KFR组做细胞功能分析.与0 μmol/L KFR组相比,处理48 h后的0.01、0.1、1 μmol/L KFR组细胞迁移率及成骨桥蛋白(OPN)、骨唾液蛋白II(BSP-II)、骨形态发生蛋白2(BMP2)、骨碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录因子2(RUNX2)、osterix(OSX)蛋白相对表达水平较高,0.1、1 μmol/L KFR组侵袭细胞数较多.此外,磷酸化的p38(p-p38)蛋白相对表达水平在0.01、0.1、1 μmol/L KFR组显著高于0 μmol/L KFR组,在0.1 μmol/L KFR组高于0.1 + SB203580组,而在SB203580组低于0.1 + SB203580组.与0.1 + SB203580组相比,细胞迁移率及OPN、BSP-II、BMP2、ALP、RUNX2、OSX蛋白相对表达水平在0.1 μmol/L KFR组较高,而在SB203580组较低,侵袭细胞数在0.1 μmol/L KFR组较多,而在SB203580组较少.结论:KFR能促进HPL-MSC迁移和成骨细胞分化,可能是通过激活p38 MAPK通路实现的.

关键词：山柰酚、人牙周韧带间充质干细胞、成骨分化、迁移、p38丝裂原活化蛋白激酶

所属期刊栏目：20

分类号：R780.2;R363(口腔科学)

资助基金：河北省医学科学研究课题20210670

在线出版日期：2023-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：18-25