半乳糖凝集素-1在二甲双胍抑制胆管癌细胞增殖中的作用和机制

摘要：

目的:探讨半乳糖凝集素-1(Galectin-1,Gal-1)在二甲双胍抑制胆管癌细胞增殖中的作用及分子机制.方法:以HuCCT1细胞为研究对象,给予不同剂量二甲双胍处理24、48、72 h,采用CCK8检测二甲双胍对细胞生存率的影响,以 0、20 mmol/L 的二甲双胍处理细胞 24 h,利用克隆形成实验、流式细胞仪、DAPI染色等分析二甲双胍对细胞克隆形成、细胞周期及细胞凋亡小体的影响;利用TCGA、GEPIA、UALCAN、HPA等数据库分析Gal-1在胆管癌中的表达及对胆管癌患者生存率的影响;免疫组化检测肝内胆管癌组织和癌旁组织中Gal-1的表达改变;以 0、20 mmol/L 的二甲双胍处理细胞 24 h,利用Western Blot技术检测Gal-1及与细胞增殖密切相关的蛋白PI3K、AKT、mTOR等的蛋白表达;进一步利用慢病毒转染技术构建Gal-1稳定沉默表达的HUCCT8细胞株,Western Blot分析Gal-1、PI3K、AKT、mTOR等的蛋白水平.结果:随二甲双胍处理浓度的增高和处理时间的延长,细胞存活率显著降低,克隆形成实验结果显示,对照组和20 mmol/L二甲双胍处理组的克隆形成率分别为18.17％和1.98％,二甲双胍处理组表现为显著的G2期细胞阻滞,且伴随细胞凋亡小体的大量形成.生信分析结果显示Gal-1在胆管癌细胞中表达显著增高,利用癌组织和癌旁组织进行免疫组化的结果与生信分析结果一致,且Gal-1的高表达与胆管癌患者的OS密切相关;二甲双胍处理的HuCCT1细胞中Gal-1的表达显著降低,并伴随PI3K/AKT信号通路的抑制;此外,抑制Gal-1的表达不仅可降低细胞的增殖能力还限制抑制PI3K/AKT信号通路.结论:二甲双胍可通过抑制肝内胆管癌中Gal-1的表达,抑制PI3K/AKT信号通路的活化,进而导致细胞增殖抑制.

关键词：二甲双胍、肝内胆管癌、Gal-1、PI3K/AKT

所属期刊栏目：20

分类号：R735(肿瘤学)

资助基金：湖南省肝胆胰肠诊疗能力提升项目

在线出版日期：2023-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：18-23