GDF11过表达稳转U251细胞株的构建

摘要：

目的:构建过表达生长分化因子11(GDF11)的神经胶质瘤U251稳转细胞株.方法:合成GDF11全长序列,构建HBLV-h-GDF11-3×flag-LUC-PURO慢病毒载体.将其与质粒pAX2和pMD2G共同转染293T细胞,收集上清并浓缩,获得慢病毒浓缩液.利用该慢病毒感染U251细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳定过表达GDF11的细胞株,通过RT-PCR鉴定稳转细胞株中GDF11 mRNA的表达水平.结果:测序结果与设计序列一致,慢病毒浓缩液滴度为3.0×108 TU/mL,RT-PCR结果显示在该稳转细胞株中GDF11表达水平上调154倍.结论:成功构建了稳定过表达GDF11的U251细胞株,为进一步研究GDF11在神经胶质瘤中的作用奠定了基础.

关键词：GDF11、神经胶质瘤、慢病毒、稳转细胞株

所属期刊栏目：19

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：湖南省自然科学基金项目;湖南省教育厅科学研究项目;国家级大学生创新创业训练计划项目;国家级大学生创新创业训练计划项目;湖南省大学生创新创业训练计划项目

在线出版日期：2022-12-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：17-20